[VIP第1年] 指数:3
PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒，10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板，扩增程序为，95℃，11分钟；94℃，20 秒，59℃，3分钟，30个循环；60℃，10分钟；4℃保存；电泳在ABI 3500XL仪器中进行；电泳上样体系为，1 μl PCR产物，9 μl甲酰胺，其中已加Liz。 实施例3 以玻璃纤维膜提取土壤尿液DNA 1）DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤，烘干，取100-200 mg土壤样品，加入样品管中，然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k，震荡混匀后，75℃加热裂解15分钟；最大转速离心5分钟，将上清液转移至新的样品管中，加入800 ul结合液，混匀；混合液转移至装有玻璃纤维的离心柱中，上海益启生物土壤DNA提取的销售电话。普陀区土壤DNA提取土壤DNA提取
实验的时候，有没有遇到过实验结果不符合预期的情况，提取DNA的纯度过低、浓度达不到预期或者是出现弥散现象。***给大家聊一聊一下其他同学遇到的问题，以及MP技术人员给出的解决方案，希望可以帮到大家，在以后的实验中顺顺利利~问题1：土壤样品含水量过高怎么办？解决思路：· 如果土壤样品过湿，可先将样本10，000 x g，离心30s，尽可能多的去除液体。问题2：DNA产量低怎么办？解决思路：· 样本微生物含量低：【1】增加样本量【2】金山区土壤微生物DNA土壤DNA提取批发益启生物公司带您了解土壤DNA提取详情。
（c）漂洗液，所述漂洗液为70-80%乙醇； （d）洗脱液，其组分为：10 mmol/L Tris-HCl，0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二钠，pH 8.0； （e）硅基DNA吸附材料，所述硅基DNA吸附材料为二氧化硅纳米颗粒、硅胶膜、玻璃纤维膜、石英膜、二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒中的任意一种。 使用本发明的试剂盒，用以提取土壤尿液DNA的方法，包括以下步骤： 1）DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤样品，离心分离土壤和上清液，上清液加入结合液，混合后加入硅基DNA吸附材料，分离硅基DNA吸附材料和液体，漂洗硅基DNA吸附材料，洗脱DNA；具体包括以下步骤： a.刮取含有尿液的表层土壤，烘干，
NA Kit for Soil或FastDNA Spin Kit for Soil，按照土壤试剂盒提取protocol进行。有效裂解：采用介质E，介质E中研磨珠与菌体大小，可以有效裂解各种菌体细胞。去杂提纯：试剂根据微生物DNA提取而优化设计，裂解液、杂质去除剂及漂洗液能够针对菌体特性很好的去除影响DNA纯化及下游实验的抑制剂，能够提取更多的微生物DNA。省时简便：柱膜法提取操作简单省时。·很硬或韧性的样本，可以单独用介质A（1169**050）代替土壤试剂盒中的介质E来裂土壤DNA提取上海授权代理商。
磨介质Lysing Matrix E，含有三种不同材质和直径的研磨珠，能有效裂解难以破碎的革兰氏阳性菌、***等微生物；√ 配备对核酸高特异性的结合磁珠，减少对杂质的吸附，提高核酸吸附载量；√ 采用独特的抑制物去除技术，使用去杂剂*需一步去除蛋白、多糖、胆汁盐等杂质；明显提高提取DNA的A260/A230比值。产品特点：浓：FastPrep"仪器搭配研磨珠技术，保证提取浓度高。纯：独特的抑制物去除技术，提高A260/A230，保障提取纯度好提取的DNA可在线订购MP正规产品土壤DNA提取。普陀区土壤DNA提取土壤DNA提取
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取100-200 mg土壤样品，加入样品管中，然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k，震荡混匀后，75℃加热裂解15分钟； b.最大转速离心5分钟，将上清液转移至新的样品管中，加入800 ul结合液，混匀； c.将上一步的混合液转移至硅基DNA吸附材料，分离液体和硅基DNA吸附材料； d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料； e.用洗脱液洗脱硅基吸附材料中的DNA； 2）PCR扩增及电泳 将上步纯化的DNA进行PCR扩增，在电泳仪中检测DNA。 本发明具有以下有益效果： 本发明的土壤尿液DNA提取试剂盒及方法，配制好土壤裂解液、结合液、漂洗液、洗脱液，利用特殊成分的土壤裂解液，在加入结合液之前，样品土壤来源的二氧化硅不与DNA结合，离心分离固体颗粒和溶解了DNA的上清液，上清液中加入结合液，混合后转入含有硅基DNA吸附材料中，分离液体和硅基DNA吸附材料，漂洗硅基DNA吸附材料，洗脱获得纯化DNA；普陀区土壤DNA提取土壤DNA提取
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