[VIP第1年] 指数:3
TUNEL染色的染色步骤1. 样品准备：•将组织切片或细胞固定在载玻片上，通常使用4%多聚甲醛或其他固定剂。•进行蛋白酶K处理，以增加细胞膜的通透性，使TdT能够进入细胞并接触DNA。2. TUNEL反应：•准备TUNEL反应混合液，包括TdT酶和标记的dUTP（如荧光素或生物素标记的dUTP）。•将反应混合液滴加到样品上，在适当的温度下孵育一定时间（通常为1小时左右）。3. 洗涤：•用PBS缓冲液或其他适当的洗涤液清洗样品，去除未结合的dUTP。4. 信号检测：•如果使用的是荧光素标记的dUTP，可以直接在荧光显微镜下观察。•如果使用的是生物素标记的dUTP，则需要进一步与链霉亲和素-荧光素复合物或其他显色试剂结合，然后在显微镜下观察。Prussian蓝染色用于检测铁沉积。南京Masson染色公司
病理染色需要注意这些事项：(4)Harris苏木精染液配制的好坏直接影响切片染色质量。好的苏木精染液500ml正常染色能力为2500张左右。为保证染色质量应及时更换染液。(5)苏木精染液要经常过滤以保证染色清洁而不在切片上有染色渣的出现。(6)盐酸乙醇分化液配制参见本书第十二章。分化时间可根据分化液的新旧适当调整，新的分化液时间短些。分化的目的就是让该染上要清晰地染上，而不该着色的一定要分化掉。(7)氨水返蓝液浓度不可过高，返蓝时间不可过高，不要过长，否则会发生脱片现象。南京番红-固绿染色Picrosirius红染色用于显示心脏和肾脏中的胶原纤维。
在脑卒中模型中用到的染色方法：•在脑卒中（如中风）的研究中，TTC染色同样用于区分正常的脑组织和缺血性损伤区域。正常的脑组织会被染成红色，而缺血区域则保持无色。•通过这种方法，研究人员可以直观地观察到脑组织中的缺血**和半影区，并进行定量分析。染色步骤1. 准备样品：•将动物安乐死后，迅速取出心脏或脑组织，并切成一定厚度的切片（通常为2mm厚）。2. 染色：•将切片放入预先配制好的TTC溶液中（通常是1%~2%的TTC溶解在生理盐水中）。•将切片置于37°C恒温水浴中孵育一段时间（通常为15-30分钟）。3. 固定：•染色完成后，将切片转移到4%多聚甲醛或其他固定液中进行固定，以防止组织自溶和保存染色结果。4. 拍照和分析：•固定后的切片可以用相机拍照记录，然后使用图像分析软件测量梗死区域和总组织面积，计算梗死面积占总组织面积的百分比。优点•操作简便：
病理染色实验是一种通过对生物组织或细胞的研究来揭示疾病发生和发展机制的实验方法。这些实验通常涉及对生物样本进行染色、观察、测量和分析，以揭示组织或细胞的结构和功能异常。以下是一些与病理实验相关的主题：组织切片与染色•取样与制备：病理学家会从患者的生物组织中取得细小的切片，这些切片通常是通过手术或活检获得的。•染色方法：使用不同的染色方法可以使细胞结构和组织的特定部分更易于观察。常见的染色方法包括苏木精-伊红（H&E）染色、Masson三色染色、天狼星红染色等。•显微镜观察：染色后的切片在显微镜下进行观察，以确定是否存在异常，并了解这些异常的性质。染色切片在法医学中用于分析组织样本。
病理染色切片对于诊断各种疾病，如**，具有重要意义。1.冰冻包埋及切片：•基本原理：冰冻切片（frozensection）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。这种方法能够较好地保存细胞膜表面和细胞内多种酶的活性以及抗原的免疫活性。•应用：由于冰冻切片的制作过程比石蜡切片快捷、简便，因此多应用于手术中的快速病理诊断。它可以在短时间内提供病理信息，帮助实验人员在实验过程中做出及时的明确的决策。 甲苯胺蓝染色常用于检测肥大细胞颗粒。南京ATP染色检测
染色切片帮助展示动物模型的病理变化。南京Masson染色公司
病理染色切片过程中值得注意的是1％伊红水溶液是理想的胞浆染液。要选择好水溶性的伊红染料使胞质鲜艳一些，切片不但漂亮且利于观片。(9)切片染色后的脱水要充分，每道乙醇脱水的时间不要过短，尤其是三道无水乙醇更为如此。无水乙醇要勤更换。(10)切片经***一次无水乙醇后尽快地放人二甲苯中。在夏季室内湿度较大的环境中更是如此。如切片在湿度大的空气中停留时间过长就会在封片时产生雾气，而不能现片。其原因是无水乙醇吸收了空气中的水汽，在二甲苯中难以分离析出，当用中性树胶封片后，二甲苯挥发，而水汽留在胶中产生雾气。(11)封片所使盖玻片需大小合适、清洁。树胶用量视盖玻片大小而定，要求不发生溢胶或缺如。(12)不提倡切片经无水乙醇，然后干燥，直接用中性树胶封固。这样会产生人为的细小黑点，与细胞核相似。(13)封片要在通风厨中进行，防止二甲苯污染工作间，危害技师的身体。南京Masson染色公司
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