•病理染色流程之组织脱水:样品经过固定后,将通过一系列的酒精梯度逐步脱水,然后用二甲苯透明化,***浸入石蜡中。这一系列步骤旨在去除组织中的水分,使其变得坚硬并易于切片。•石蜡包埋区:脱水后的组织被包裹在石蜡中,形成一个坚硬的块状物,便于后续的切片操作。•切片制作区:使用石蜡切片机(如Leica HistoCore MULTICUT)将包埋好的组织切成薄片(通常为4-5微米厚),以便于进一步的染色和观察。
英瀚斯专业病理实验平台,从取材固定包埋脱水切片染色拍照分析,一站式完成。 Oil Red O染色用于检测脂质沉积。南京Masson染色检测
TUNEL染色的染色步骤1. 样品准备:•将组织切片或细胞固定在载玻片上,通常使用4%多聚甲醛或其他固定剂。•进行蛋白酶K处理,以增加细胞膜的通透性,使TdT能够进入细胞并接触DNA。2. TUNEL反应:•准备TUNEL反应混合液,包括TdT酶和标记的dUTP(如荧光素或生物素标记的dUTP)。•将反应混合液滴加到样品上,在适当的温度下孵育一定时间(通常为1小时左右)。3. 洗涤:•用PBS缓冲液或其他适当的洗涤液清洗样品,去除未结合的dUTP。4. 信号检测:•如果使用的是荧光素标记的dUTP,可以直接在荧光显微镜下观察。•如果使用的是生物素标记的dUTP,则需要进一步与链霉亲和素-荧光素复合物或其他显色试剂结合,然后在显微镜下观察。南京Masson染色检测银染技术用于显示神经纤维和网状纤维。
病理染色切片过程中值得注意的是1%伊红水溶液是理想的胞浆染液。要选择好水溶性的伊红染料使胞质鲜艳一些,切片不但漂亮且利于观片。(9)切片染色后的脱水要充分,每道乙醇脱水的时间不要过短,尤其是三道无水乙醇更为如此。无水乙醇要勤更换。(10)切片经***一次无水乙醇后尽快地放人二甲苯中。在夏季室内湿度较大的环境中更是如此。如切片在湿度大的空气中停留时间过长就会在封片时产生雾气,而不能现片。其原因是无水乙醇吸收了空气中的水汽,在二甲苯中难以分离析出,当用中性树胶封片后,二甲苯挥发,而水汽留在胶中产生雾气。(11)封片所使盖玻片需大小合适、清洁。树胶用量视盖玻片大小而定,要求不发生溢胶或缺如。(12)不提倡切片经无水乙醇,然后干燥,直接用中性树胶封固。这样会产生人为的细小黑点,与细胞核相似。(13)封片要在通风厨中进行,防止二甲苯污染工作间,危害技师的身体。
对于荧光染色切片往往需要用到冰冻包埋及切片基本原理:•快速冷却:将新鲜的组织样本迅速冷却到低温(通常为-20°C至-30°C),使其变得坚硬。•切片:使用冷冻切片机将冷冻的组织切成薄片。由于组织没有经过固定的步骤,因此可以较好地保存细胞膜表面和细胞内的多种酶活性以及抗原免疫活性。优势:•快速:制作过程比石蜡切片更快捷,通常只需几分钟到几十分钟。•简便:不需要复杂的脱水、透明化和浸蜡步骤。•活性保留:能够较好地保存细胞内的酶活性和抗原免疫活性,适用于需要检测这些活性的研究。Nissl染色用于显示神经元的尼氏体。
不同的染色方法可以达到不同的实验目的4.观察神经组织:•银染色:用于显示神经纤维和细胞外基质,适合神经组织的研究。5.检测特定蛋白质或抗原:•免疫组化染色:利用抗体与特定抗原结合,通过酶或荧光标记显示抗原位置,广泛应用于**研究和诊断。•免疫荧光染色:利用荧光标记的抗体与特定抗原结合,在荧光显微镜下观察,适用于研究细胞和组织中的特定蛋白质和分子。1.检测细胞增殖和凋亡:•Ki-67染色:用于检测细胞增殖。•TUNEL染色:用于检测细胞凋亡。1.研究血管生成:•CD31或VEGF染色:用于检测血管内皮细胞和血管生成相关蛋白。2.检测脂质和脂肪细胞:•油红O染色:用于检测脂质和脂肪细胞,常用于研究脂肪组织和代谢疾病。病理染色切片用于显微镜下观察组织结构。南京Tunel染色价格
甲苯胺蓝染色常用于检测肥大细胞颗粒。南京Masson染色检测
普鲁士蓝的应用领域1. 铁代谢相关疾病:•在肝脏、脾脏、骨髓等***中,鲁士蓝染色用于检测铁沉积,帮助诊断和评估铁过载疾病,如血色素沉着症(Hemochromatosis)和继发性铁过载。2. 脑组织中的铁沉积:•在神经退行性疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病)的研究中,鲁士蓝染色用于检测脑组织中的铁沉积,这些沉积可能与疾病的进展有关。3. **研究:•在某些类型的**中,铁代谢异常可能导致铁沉积,鲁士蓝染色可以用于检测这些异常。染色步骤1. 样品准备:•将组织切片固定在载玻片上,通常使用福尔马林或其他固定剂。•用蒸馏水或PBS缓冲液清洗切片。2. 还原反应:•将切片浸入含有盐酸(HCl)和亚硫酸钠(Na₂S₂O₃)的溶液中,在室温下孵育一定时间(通常是10-20分钟),以还原三价铁离子。南京Masson染色检测
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