胶体金标记蛋白质影响因素:胶体金与蛋白质之间是通过正负电荷之间存在的范徳瓦尔引力相结合的,胶体金颗粒与蛋白质分子之间无共价键联系。胶体金标记蛋白质过程属于物理过程,标记体系的pH值、离子浓度及二者的比例等均可影响标记效果,一般情况下,当胶体金pH值接近或大于蛋白质等电点时,胶体金对蛋白质的吸附力强。反之,当胶体金pH值低于蛋白质等电点时,则会凝集而失去结合能力。如在标记葡萄球菌A蛋白(SPA)时,SPA等电点是pI5.1,胶体金的pH值可选择在pH5.9-6.2。标记单抗时,胶体金的pH值适宜在pH8.2。对于含有多种大分子蛋白的样品,如多价抗体的标记,实际上很难满足体系中各种蛋白分子的等电点的要求。为了取得较好的标记条件,可先将标记蛋白用低于pH9.0的缓冲液透析,广东胶体金快速检测读数仪报价,胶体金的pH值调在pH9.0进行标记。影响胶体金标记蛋白质是否成功的另一个重要因素是胶体金与标记蛋白质的用量比例。通常蛋白质的用量取决于胶体金的颗粒大小,广东胶体金快速检测读数仪报价,金颗粒直径越小,广东胶体金快速检测读数仪报价,金颗粒所具有的总表面积就越大,可吸附蛋白质的量也就越大。快捷的仪器校准方案。广东胶体金快速检测读数仪报价
胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金也是免疫电镜技术中较为理想的免疫标记物。胶体金技术具有方便快捷、特异敏感、稳定性强、不需要特殊设备和试剂、结果判断直观等优点, 因而特别适合于广大基层检验人员以及大批量检测和大面积普查等, 具有巨大的发展潜力和广阔的应用前景。重庆胶体金读数仪参考价格胶体金技术很适合于广大基层检验人员以及大批量检测和大面积普查等, 具有巨大的发展潜力和广阔的应用前景。
胶体性质胶体金颗粒大小多在1~100nm,微小金颗粒稳定地、均匀地、呈单一分散状态悬浮在液体中,成为胶体金溶液。胶体金因而具有胶体的多种特性,特别是对电解质的敏感性。电解质能破坏胶体金颗粒的外周永水化层,从而打破胶体的稳定状态,使分散的单一金颗粒凝聚成大颗粒,而从液体中沉淀下来。某些蛋白质等大分子物质有保护胶体金、加强其稳定性的作用。呈色性微小颗粒胶体呈红色,但不同大小的胶体呈色有一定的差别。小的胶体金(2~5nm)是橙黄色的,中等大小的胶体金(10~20nm)是酒红色的,较大颗粒的胶体金(30~80nm)则是紫红色的。根据这一特点,用肉眼观察胶体金的颜色可粗略估计金颗粒的大小。近10多年来胶体金标记已经发展为一项重要的免疫标记技术.胶体金免疫分析在药物检测、生物医学等许多领域的研究已经得到发展,并越来越受到相关研究领域的重视.光吸收性胶体金在可见光范围内有一单一光吸收峰,这个光吸收峰的波长(λmax)在510~550nm范围内,随胶体金颗粒大小而变化,大颗粒胶体金的λmax偏向长波长,反之,小颗粒胶体金的λmax则偏于短波长,表1所列为部分胶体金的λmax。
生产企业必须能够克服大量的技术难题才能制备出能应用于诊断领域的免疫金复合物。免疫金标记技术是一种将胶体金颗粒与包括抗原、抗体在内的许多蛋白质标记形成免疫金复合物的技术。虽然这种免疫金标记技术呈现出多种多样的应用方式,但目前主要应用是以快速检测试纸盒的形式使用于疾病的诊断和监测。在过去的十年里,基于膜上的快速诊断技术(包括侧向层析和渗滤两种形式)的发展为金标免疫试剂创造了巨大的市场。使用该技术制备的标记物作为检测系统中的指示试剂使用在检测敏感症、传染病、环境污染物、心梗标志物、早孕以及兽医等领域。如同其他标记结合物一样,获得成功的结果必须通过采用高质量的试剂(蛋白质和胶体金)、丰富的生产经验和对标记物产品检测结果分析的完整的知识结构,这需要与免疫金产品使用方法的终端客户培训一起进行。 测试质控条,相对极差≤5%。
原料颗粒胶体金颗粒大小的选择取决于胶体金结合物的用途。如下段落描述了两个常用的胶体金应用领域:显微检测技术和快速诊断技术。显微检测技术任何1-40nm的胶体金结合物可以应用于电子显微镜和光学显微镜检测领域。然而即使在透射电镜放大25万倍的情况下,也不可能观测到1或2nm的胶体颗粒。利用银增强胶体金技术可以让终端客户能够看到胶体金标记的这种较小的抗原性位点。银增强染色技术是指通过银盐在胶体金颗粒表面沉积,使胶体金颗粒增大到在显微镜下能观察的尺寸。当所有的胶体金颗粒都是同样大小和形状时,该方法具有效率高、易控制的特点且低变异系数。使用如1-2nm的胶体金小颗粒时,由于空间位阻较大的胶体金颗粒不能标记的一些抗原决定簇位点,也变得容易接近。因而,一旦确定抗原位置,在银增强染色技术作用下,金标记变得容易联接和形成。在不采用银增强染色电镜技术的情况下,几个不同的抗原反应决定簇可能被标记在相同的片段上。在这种情况下,采用可分辨出的不同尺寸大小的胶体金标记特异性抗体,该抗体对不同反应决定簇具有特异识别。 支持多联卡,支持单C多T混合的多联卡。甘肃手持式胶体金读数仪零售价格
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金标记方法学的局限性在于不易准确定量(变异系数大)、不易自动化分析、试剂成本偏高及质量控制困难。金标记法商品化试剂盒众多,无统一管理,存在问题有:命名与方法学有时不符,方法学表示不明确,包被物与检测物表示不明确;各厂家生产产品质量不一,无比较尺度;试剂盒没有标出敏感性(有时即使标出也不相符)及检测上限(有发生前带),敏感性及临界值标准不统一,造成一些疾病诊断上的假阴性、假阳性;结果不稳定、重复性不满意,试剂盒应有低浓度标准测试重复性;室内质控无有效方法:试剂盒中质控点或质控线中包被的是与标记结合物能直接结合的物质,只能作为试验过程是否有效的参考指标(标记结合物是否失效、层析过程是否正常、被测物中有无干扰物质等),不能反映敏感性、特异性、重复性等质量指标;室内质控应有质控物(应有低浓度)经常检测试验条(卡)有否呈色、呈色时间、呈色深浅,将敏感性及敏感性改变作为质控要点;没有试剂盒批检。 广东胶体金快速检测读数仪报价
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