层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定性好,不需冷藏。*相比而言,其生产成本和检测成本均较低,中国澳门自动化读数仪定制,中国澳门自动化读数仪定制。*检测标本种类多:可用于查血、尿液或粪便,中国澳门自动化读数仪定制,因而适合各种检查测试质控条,各通道测量结果相对极差≤5%。中国澳门自动化读数仪定制
金标记方法学的局限性在于不易准确定量(变异系数大)、不易自动化分析、试剂成本偏高及质量控制困难。金标记法商品化试剂盒众多,无统一管理,存在问题有:命名与方法学有时不符,方法学表示不明确,包被物与检测物表示不明确;各厂家生产产品质量不一,无比较尺度;试剂盒没有标出敏感性(有时即使标出也不相符)及检测上限(有发生前带),敏感性及临界值标准不统一,造成一些疾病诊断上的假阴性、假阳性;结果不稳定、重复性不满意,试剂盒应有低浓度标准测试重复性;室内质控无有效方法:试剂盒中质控点或质控线中包被的是与标记结合物能直接结合的物质,只能作为试验过程是否有效的参考指标(标记结合物是否失效、层析过程是否正常、被测物中有无干扰物质等),不能反映敏感性、特异性、重复性等质量指标;室内质控应有质控物(应有低浓度)经常检测试验条(卡)有否呈色、呈色时间、呈色深浅,将敏感性及敏感性改变作为质控要点;没有试剂盒批检。 甘肃胶体金免疫层析读数仪报价通线方式:USB接口,RS232,网口、WIFI数据传输。
蛋白质的标记:在体外诊断应用领域,通常采用抗原或抗体与免疫金结合制备免疫金结合物。采用单克隆抗体或多克隆抗体,是影响抗体标记的因素之一。虽然诊断产品中大多数抗体标记采用IgG抗体,但IgM、IgE和IgA抗体也可以成功标记上胶体金。标记时,进一步必须考虑抗体的亚型。在鼠抗IgG亚型中,例如IgG1亚型成功率高,而IgG3亚型被证实有技术难度。将抗原标记胶体金也面临技术难题。将常见的抗原标记上胶体金比较容易。但是受抗原与胶体金结合方式的影响,金标记覆盖的蛋白反应决定簇小于50%时才能高成功率制备出标记物。因此,考虑蛋白结合金的方式对标记开发人员非常重要。
支持所有金标项目定性、定量及半定量检测;ID卡加密与授权,内置浓度曲线及批号,保护试剂厂家信息;CT线位置可自定义识别,支持线宽及线间距设定,支持实时显示检测曲线;内置大容量存储数据库,可随时分类查询已测项目;支持医院通用数据库接口,支持LIS系统,内置USB接口,支持可扩展外设;可内置条形码识别模块,可加装二维码识别模块自动准确识别CT线位置,纠错范围可达 ±3mm;定制机型可内置充电电池;整机支持按客户要求定制。 内嵌二维码扫码器,支持二维码标曲。
标记:胶体金与蛋白质(IgG)的结合:将胶体金和IgG溶液分别以0.1Mol/LK2CO3调pH至9.0,电磁搅拌IgG溶液,加入胶体金溶液,继续搅拌10min,加入一定量的稳定剂以防止抗体蛋白与胶体金聚合发生沉淀。常用稳定剂是5%胎牛血清(BSA)和1%聚乙二醇(分子量20KD)。加入量:5%BSA使溶液终浓度为1%;1%聚乙二醇加至总溶液的1/10.在接近并略为高于蛋白质等电点的条件下标记是比较合适的,在此情况下蛋白质分子在金颗粒表面的吸附量大。步骤:①用0、1mol/LK2CO3或0.1mol/LHCl调节金溶胶至所需pH(标记SPA时调到pH6.0)。②于100ml金溶胶中加入合适标记量的蛋白质溶液(体积为2~3ml),搅拌2~3分钟。③加入5ml1%PEG20000溶液。④于10000~100000g离心30~60分钟(根据粒径大小选择不同离心条件),小心吸去上清液(切忌倾倒)。⑤将沉淀悬浮于一定体积含0.2~0.5mg/mlPEG20000的缓冲液中,离心沉淀后,再用同一缓冲液恢复,浓度以A1cm/540nm=1.5左右为宜,以0.5mg/ml叠氮钠防腐,置4℃保存。⑥包被后的金溶胶也可浓缩后于SephadexG-200柱进行凝胶层析分离纯化,以含0.1%BSA的缓冲溶液洗 通常用IgG包被的金溶胶洗脱液pH为8.2,以A蛋白包被的金溶胶洗脱液为pH7.0 10.1寸电容大屏,超高分辨率。陕西胶体金快速定量读数仪
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免疫胶体金的制备1、制备胶体金标记蛋白质应注意的问题(1)蛋白质的预处理。蛋白质应先对低离子强度的水透析,去除盐类成分。用微孔滤膜或超速离心除去蛋白质溶液中的细小微粒。(2)低盐浓度的缓冲液。过量盐可使金颗粒发生凝集。(3)当PH接近于蛋白质等电点或略偏碱性。蛋白质所处溶解状态较适合偶联,蛋白质分子在金颗粒表面的吸附量较大。(4)蛋白质适用量的选择:能使胶体金稳定的合适蛋白量再加10%即为zui佳标记蛋白量。(5)胶体金与蛋白质偶联后,加入稳定剂,以避免产生凝集。一般选用PEG(分子量为20000)和牛血清白蛋白作稳定剂。2、常见方法(1)用0.1mol/LK2CO3或0.1mol/LHCl调节金溶胶至所需pH。(2)加入zui佳标记量的蛋白质溶液,搅拌2~3分钟。(3)加入5ml1%PEG20000溶液。(4)于10000~100000g离心,小心吸去上清液。(5)将沉淀悬浮于一定的缓冲液中,离心沉淀后,再用同一缓冲液恢复,浓度以A1cm/540nm=1.5左右为宜,置4℃保存。中国澳门自动化读数仪定制
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