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Vakirs等于1985年建立了金标免疫滲滤技术,该技术原理是:先用胶体金标记二抗,随后将抗原物质包被于醋酸纤维素或硝酸纤维束膜,后采用特定形状的塑料卡盒及吸水滤纸等组装垂直渗滤装置。反应过程是;先将检测样品(血清)加在反应膜上,若样品中存在被检特异性抗体,则检测样品快速渗滤通过反应膜时,样品中的特异性抗体就会与包被于反应膜上的抗原结合,随后用缓冲液渗滤洗去样品中剩余的物质,再将金标二抗加于反应膜表面,当金标二抗在反应膜的渗滤过程中,金标二抗就会与结合于反应膜上的特异性抗体结合,再用缓冲液渗滤洗去未结合的金标二抗。此时,反应膜上会显示出红色的点。若样品中没有被检特异性抗体,则抗原抗体连锁反应不成立,金标二抗不会留在反应膜,也就不会出现红色的点。由于金标免疫渗滤技术操作简单,反应速度快,2-3分钟出现结果,特异性强,敏感性高,此项技术自诞生之日期,备受业界高度关注。Spielberg等于1989年建立了人类免疫缺陷病毒抗体检测金标免疫渗滤检测技术。金标免疫渗滤技术现已应用于医学临床检验,疫病预防、动物疫病防控,食品安全检测及农业病虫害检测等领域。金标渗滤法的缺陷是金标抗体有效期短,一般为6个月。北京单通道胶体金读数仪厂家直销采用CMOS扫描技术,测量精度高,比色法测量精度较高。
免疫胶体金的应用1、胶体金在光镜水平、电镜水平的应用直径为3~15nm胶体金均可用作电镜水平的标记物。优点是可以通过应用不同大小的颗粒进行双重或多重标记。胶体金用于光镜水平、电镜水平的研究,主要包括:①细胞悬液或单层培养中细胞表面抗原的观察。②单层培养中细胞内抗原的检测。③组织切片中抗原的检测。2、胶体金在流式细胞仪中的应用应用胶体金标记的抗体,分析细胞表面抗原。胶体金可以明显地改变红激光散射角,区分不同的标记,能同时进行几种标记。3、凝集试验单分散的免疫金溶胶清澈透明。与相应抗原或抗体发生专一性反应后出现凝聚,溶胶颗粒增大、沉降,光散射随之发生变化,溶液的颜色发生变化。4、免疫印迹技术用聚丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白质分离,得到的区带转移至硝酸纤维素膜,与特异性的抗体保温后,再与胶体金标记物温育,根据膜上胶体金颗粒颜色深浅可测知样品中的特异性抗原。金免疫印迹技术有相当高的灵敏度。采用免疫金银染色法,灵敏度可低至。
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