蛋白质适用量的选择:胶体金与标记蛋白用量之比的确定:根据待标记蛋白的要求,将胶体金调好pH之后,分装10管,每管1ml.将标记蛋白(以IgG为例)以0.005Mol/LpH9.0硼酸盐缓冲液做系列稀释为5µg/ml~50µg/ml,分别取1ml,加入上列金胶溶液中,混匀。对照管只加1ml稀释液。5min后,在上述各管中加入0.1ml10%NaCl溶液,山西胶体金法读数仪在线议价,混匀后静置2h,观察结果。结果观察,对照管(未加蛋白质)和加入蛋白质的量不足以稳定胶体金的各管,均呈现出由红变蓝的聚沉现象;而加入蛋白量达到或超过低稳定量的各管仍保持红色不变。以稳定1ml胶体金溶液红色不变的低蛋白质用量,即为该标记蛋白质的低用量,在实际工作中,可适当增加10%~20%。将待标记的蛋白质储存液作系列稀释后,分别取0.1ml(含蛋白质5~40ug)加到1ml胶体金溶液中,另设一管不加蛋白质的对照管,5分钟后加入0.1ml10%NaCl溶液,混匀后静置2小时,不稳定的金溶胶将发生聚沉,山西胶体金法读数仪在线议价,能使胶体金稳定的适合蛋白量再加10%即为标记蛋白量。通线方式:USB接口,RS232,山西胶体金法读数仪在线议价,网口、WIFI数据传输。山西胶体金法读数仪在线议价
胶体金标记抗体技术:建立于20世纪70年代初,因胶体金液呈樱桃红色,故标记抗体后进行免疫染色,可直接光镜观察。金颗粒的电子密度相当高,电镜下清晰可辨。因此近年来该技术被广泛应用于生物学和医学各领域的电镜研究,自20世纪80年代开始,有取代免疫酶细胞化学电镜技术之趋势。该技术的主要优点:①省时.程序较酶标抗体法简单;②不需H2O2等处理,对组织细胞超微结构保存较好;③金颗粒电子密度高,电镜下容易识别,且易于同其他免疫反应产物区别;④可与酶标抗体或铁蛋白标记抗体等相结合进行双标记染色,研究两种不同抗原在超微结构水平的定位;⑤也可用不同直径的金颗粒标记不同的抗体,研究两种以上抗原的共存;⑥因抗原抗体反应部位结合金颗粒数量的多少与抗原的量呈正相关,故可用于组织细胞抗原的半定量分析;⑦将胶体金标记的一抗体直接加入培养液中,利用培养细胞具有吞饮作用的特点,可进行培养细胞内的抗原定位研究;⑧金颗粒具有较强激发电子能力,故也可用于扫描电镜对细胞表面抗原或一些受体的定位观察;⑨胶体金液无毒,对人体亦无损伤。因此,胶体金标记抗体染色技术是目前免疫电镜技术很常用的理想染色方法。 青海胶体金检测读数仪代理商POCT设计体积小、重量轻,便于携带。
金标免疫试验的原理将氯金酸(HAuCl4)用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒(胶体金)标记抗体,(或金黄色葡萄球菌A蛋白SPA)。金标为一种催化剂,经还原剂(如对苯二酸)处理,将显影剂中的银离子还原成不溶性金属银,沉淀在每个金颗粒的周围,银沉淀在光镜下可清楚地显示。滴金免疫实验原理同一般免疫斑点实验,也是用已知抗原或抗体包被硝酸纤维素膜,再用金标记抗体或抗原进行快速测定。临床应用的有两种方法:金标一步法(层析法)和金标二步法(斑点渗漏法)。具体讲即用两个人HCG—β单克隆抗体,一个抗体吸附于硝酸纤维素薄膜(NC膜)上,另一抗体结合于金溶胶颗粒表面。尿中HCG先与NC膜上的抗体-结合,然后再与金标单抗溶液反应,形成抗体一HCG一金标抗体的加心式复合物.红色的金斑点.
产品特点设计体积小,重量轻,便于携带检测操作简单,一般1-3个步骤即可完成快速定量检测半自动化检测,检测速度快,除去样品准备时间,实际检测5秒钟内即可得出结果CT线位置可自定义识别,支持线宽及线间距设定,支持实时显示检测曲线自动识别CT线位置,纠错范围可达±3mm可准确识别一条或多条T线值及CT比值单机可存储超过10000条检测记录可扩展无线网功能,实现数据网络化管理内置热敏打印机,可以随机打印结果报告强大的软件系统免疫层析技术在层析材料上发生的免疫反应,具备免疫反应的高特异性、高效率性、高亲和性的特点。
随着免疫层析技术的发展,越来越多的免疫层析试纸(胶体金试纸条)应用于食品安全、病毒、农药残留等快速检测领域。目前检测过程中,通过肉眼观察试纸条变色的传统方法受到光线差异、试纸条本底颜色、人员主观因素影响较大,容易引起结果错判及误判,且快速检测结果无法进行电子化记录,无法保留当时影像便于日后查询。
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蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备:胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。待标记蛋白溶液的制备将待标记蛋白预先对0.005Mol/LpH7.0NaCl溶液中4℃透析过夜,以除去多余的盐离子,然后100000g4℃离心1h,去除聚合物。待标胶体金溶液的准备以0.1Mol/LK2CO3或0.1Mol/LHCl调胶体金液的pH值。标记IgG时,调至9.0;标记McAb时,调至8.2;标记亲和层析抗体时,调至7.6;标记SPA时,调至5.9~6.2;标记ConA时,调至8.0;标记亲和素时,调至9~10.由于胶体金溶液可能损坏pH计的电板,因此,在调节pH时,采用精密pH试纸测定为宜。由于盐类成分能影响金溶胶对蛋白质的吸附,并可使溶胶聚沉,故致敏前应先对低离子强度的水透析。必须注意,蛋白质溶液应确保澄清无细小微粒,否则应先用微孔滤膜或超速离心除去。一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在,因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附。山西胶体金法读数仪在线议价
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