胶体金的制备1、胶体金制备的注意事项(1)玻璃容器的清洁:玻璃容器应保持清洁,用前酸洗、硅化。(2)试剂、水质:实验用水一般用双蒸水。缓冲液有足够大的缓冲容量,湖南胶体金免疫层析读数仪市场价,浓度不应过高以免金溶胶自凝。2、常用方法一般采用还原法,常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、白磷。(1)柠檬酸三钠还原法:取%氯金酸水溶液100ml加热至沸,湖南胶体金免疫层析读数仪市场价,搅动下准确加入1%柠檬酸三钠水溶液,金黄色的氯金酸水溶液在2分钟内变为紫红色,继续煮沸15分钟,冷却后以蒸馏水恢复到原体积,如此制备的金溶胶其可见光区*高吸收峰在535nm,A1cm/535nm=。2)柠檬酸三钠-鞣酸混合还原剂:改变鞣酸的加入量,湖南胶体金免疫层析读数仪市场价,制得不同大小的胶体颗粒。(3)白磷还原法:制备的胶体金直径约6nm,并有很好的均匀度,但白磷和yimi均易燃易爆,一般实验室不宜采用。 免疫金标记技术是一种将胶体金颗粒与包括抗原、抗体在内的许多蛋白质标记形成免疫金复合物的技术。湖南胶体金免疫层析读数仪市场价
半定量与定量:在测定一般正常体液中存在而在疾病时升高的物质时,如单以超过正常参考值上限为阳性界限往往不能满足临床要求。胶体金显色深浅与被测物浓度有一定相关性,因此可对被测物进行定量检测。金标定量:1、DIGFA:膜上斑点免疫金标显色终点时用光电比色2、DIGCA:由于反应在NC膜上呈横流推进,测定线上反应出现的颜色逐渐加深,液流速度、反应温度等为可变因素,很难在规定时间得到恒定结果。金标半定量:1.DIGFA2、2.DIGCA。陕西胶体金读数仪报价无锡天纵易骏的读数仪物美价优,不要犹豫欢迎咨询!
金标记方法学特点及质量控制:特异性与ELISA相似,敏感性略低于ELISA。定性检测时单个操作(NC膜条或NC反应块)、检测快速(胶体金本身为红色,不需加发色试剂,阳性反应即出现红色斑点或条带,整个操只需5—30分钟)、操作简便(蘸取或滴加标本、试剂即可)、不需特殊设备(手工)、结果明确(显红色,肉眼观察),且金标记物稳定,冷冻干燥后可在室温长期保存。金标记方法学尤其适合个人保健、床边检测、基层卫生单位检测、急诊检验、新项目小标本量筛查等。
目前胶体金试纸条的定量检测方法有以下几种:1、利用光敏电阻采集试纸条反射光强度来读取试纸条信息。该方法利用光敏电阻受到光的辐射后电导率会发生相应的变化的特性来获取试纸条中的相关信息,但光敏电阻的前历效应和纤维素膜上的水和胶体金均对信号干扰较大。2、利用反射型光纤传感器测量试纸条。在入射光纤的作用下光照射在试纸条上,光纤传感器对试纸条进行扫描,光探测器收集光纤采集到的试纸条表面的反射光并转换成电信号,电信号的大小反应了试纸条对于位置的反射光的强弱。但入射光照射的不全性,试纸条生产工艺的差异性均会影响检测结果的稳定。哪家读数仪质量过硬?请认准无锡天纵易骏。
HCG金标免疫试验:金标免疫试验的原理将氯金酸(HAuCl4)用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒(胶体金)标记抗体,(或金黄色葡萄球菌A蛋白SPA)。金标为一种催化剂,经还原剂(如对苯二酸)处理,将显影剂中的银离子还原成不溶性金属银,沉淀在每个金颗粒的周围,银沉淀在光镜下可清楚地显示。滴金免疫实验原理同一般免疫斑点实验,也是用已知抗原或抗体包被硝酸纤维素膜,再用金标记抗体或抗原进行快速测定。临床应用的有两种方法:金标一步法(层析法)和金标二步法(斑点渗漏法)。无锡天纵易骏供应读数仪 ,有想法可以来我司咨询!陕西胶体金读数仪报价
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应用在制备免疫金结合物的特异性抗体的稳定性主要取决于检测试验的技术条件。对于侧向层析分析,比较好的抗体形式是采用一般的单克隆配对。在这类检测分析中,一种单克隆抗体被标记胶体金作为指示剂,而另一种被固定于硝酸纤维素膜上作为捕获剂。每种抗体对于抗原表面的不同反应决定簇都应该是特异识别,并且这些抗原决定簇在空间结构上距离较远。多克隆抗体也可以被使用,但至少是必须经过protein-A柱层析纯化。在多数情况下,抗体经亲和层析纯化后能制备出具有较高灵敏度和特异性的结合物。这当然取决于符合试验检测可接受交叉反应的技术要求。亲和层析纯化硫酸铵沉淀法或DEAE纯化的血清,含有大量的杂蛋白将竞争性结合胶体金颗粒表面的结合位点。这些杂蛋白拥有高含量的控制蛋白与胶体金结合的三种氨基酸残基,很容易与裸露的胶体金颗粒结合。出现这种情况时,检测系统中指示剂的灵敏度水平降低。如果采用经A蛋白或G蛋白柱层析纯化的抗体,然后IgG片段中可能含有大量的非特异性的IgG,而不是需要的特异性IgG.所有的IgG将与胶体金结合,结果可能是低灵敏度。湖南胶体金免疫层析读数仪市场价
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