胶体金制备大体可分为分散法和还原法两种,目前多采用还原法制备胶体金,主要包括:白磷还原法,抗坏血酸还原法,枸橼酸三钠还原法,乙醇—超声波还原法,硼氢化钠还原法和鞣酸-枸橼酸钠还原法等方法。白磷还原法制得的胶体金颗粒直径在3nm左右,颗粒大小均匀性好,但白磷易燃易爆,配置时需十分小心。枸橼酸三钠还原法在实践中常用,其工艺过程简单,重复性好,而且可通过调整溶液中枸橼酸三钠浓度,来控制胶体金颗粒大小。乙醇—超声波还原法在实践中很少应用,一方面是由于工艺过程不好控制,重复性差,另一方面是所制金颗粒较小,除了免疫组化电镜技术中用小颗粒胶体金外,免疫检测技术中所用胶体金颗粒一般在50nm左右。硼氢化钠还原法在实践中也很少应用,一方面是由于工艺过程不好控制,重复性差,江西多通道胶体金读数仪,另一方面是所制金颗粒较小,江西多通道胶体金读数仪,除了免疫组化电镜技术等研究试验使用外,金标免疫检测技术中很少使用,江西多通道胶体金读数仪。鞣酸-枸橼酸钠还原法为常用方法之一,可通过鞣酸的浓度来控制胶体金颗粒大小。但要注意:鞣酸溶液一定要避光保存,温度必须控制在60℃,否则会影响胶体金的均一性。 层析法免疫胶体金检测试剂是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式。江西多通道胶体金读数仪
胶体金的稳定性溶胶的稳定性介于小分子离子溶液和粗分散相之间,其颗粒作布朗运动,不易受重力影响而下沉。然而,溶胶又是不稳定体系,它的胶粒溶剂化作用很弱,总面积较大、因在胶粒相互碰撞时,有自动合并为较大、较重的颗粒倾向。当胶体颗粒直径变大,超出胶体范围而从介质中沉淀出来的现象叫聚沉。影响其稳定性的主要原因有三点。(1)胶粒间的相互吸引力当胶粒相距很近时,这种吸引力可能导致胶体颗粒合并而变大。(2)胶粒及其溶剂化层胶粒及其溶剂化层(溶剂是水时就是水化层)的带电情况。一种溶胶的各个胶粒都带有相同的电荷。同性电荷相斥,双电子层变厚,胶粒带电量愈大,排斥力愈大,愈能阻止胶粒合并聚结,溶胶愈稳定。(3)胶体接口的溶剂膜当二个固体间夹有一厚层液体时,这层液体膜有一个反抗二固体接近的排斥力。两个胶粒要进一步接近,只有克服它们之间的溶剂化膜的斥力才有可能,因此溶剂膜的斥力是使溶胶稳定的原因之一。 浙江胶体金快速检测读数仪厂家直销通线方式:USB接口,RS232,网口、WIFI数据传输。
蛋白质适用量的选择:胶体金与标记蛋白用量之比的确定:根据待标记蛋白的要求,将胶体金调好pH之后,分装10管,每管1ml.将标记蛋白(以IgG为例)以0.005Mol/LpH9.0硼酸盐缓冲液做系列稀释为5µg/ml~50µg/ml,分别取1ml,加入上列金胶溶液中,混匀。对照管只加1ml稀释液。5min后,在上述各管中加入0.1ml10%NaCl溶液,混匀后静置2h,观察结果。结果观察,对照管(未加蛋白质)和加入蛋白质的量不足以稳定胶体金的各管,均呈现出由红变蓝的聚沉现象;而加入蛋白量达到或超过低稳定量的各管仍保持红色不变。以稳定1ml胶体金溶液红色不变的低蛋白质用量,即为该标记蛋白质的低用量,在实际工作中,可适当增加10%~20%。将待标记的蛋白质储存液作系列稀释后,分别取0.1ml(含蛋白质5~40ug)加到1ml胶体金溶液中,另设一管不加蛋白质的对照管,5分钟后加入0.1ml10%NaCl溶液,混匀后静置2小时,不稳定的金溶胶将发生聚沉,能使胶体金稳定的适合蛋白量再加10%即为标记蛋白量。
胶体金的制备1、胶体金制备的注意事项(1)玻璃容器的清洁:玻璃容器应保持清洁,用前酸洗、硅化。(2)试剂、水质:实验用水一般用双蒸水。缓冲液有足够大的缓冲容量,浓度不应过高以免金溶胶自凝。2、常用方法一般采用还原法,常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、白磷。(1)柠檬酸三钠还原法:取%氯金酸水溶液100ml加热至沸,搅动下准确加入1%柠檬酸三钠水溶液,金黄色的氯金酸水溶液在2分钟内变为紫红色,继续煮沸15分钟,冷却后以蒸馏水恢复到原体积,如此制备的金溶胶其可见光区*高吸收峰在535nm,A1cm/535nm=。2)柠檬酸三钠-鞣酸混合还原剂:改变鞣酸的加入量,制得不同大小的胶体颗粒。(3)白磷还原法:制备的胶体金直径约6nm,并有很好的均匀度,但白磷和yimi均易燃易爆,一般实验室不宜采用。 半自动化检测,检测速度快,除去样品准备时间,实际检测5秒钟内即可得出结果。
胶体金颗粒大量聚集后会产生肉眼可见的红色,通过对检测线与质控线上红色深浅的比较,实现免疫分析结果的快速判断。但肉眼观察试纸条上的颜色进行判读,极易受到人眼、外部光线及其他情况的影响:如需要判读大量检测试纸条,那么将会消耗大量的时间,并且人眼易视觉疲劳而产生判读的错误;被检测物质处于临界状态时,人眼无法直接判定阴性和阳性;肉眼观察颜色变化无法为检测单位提供定量数据。因此,胶体金试纸条的定量检测就显得尤为重要。台式或便携式胶体金读数仪,提供客户选择。安徽胶体金检测读数仪零售价格
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