[VIP第1年] 指数:3
同时食物、饮水用具也可以传染细小病du。其中以3-6个月龄的纯种比熊犬易感性**gao，但是如果比熊犬得过一次，那么病愈后的比熊犬可获得免疫li。三、比熊细小病du性肠炎治聊方法比熊在生病初，应该尽快注射犬细小病du单克隆抗体或含抗犬细小病du抗体的高免血清，同时针对出血性胃肠炎与脱水症状，采取强心补液、抗jun消yan、止吐、止泻和止血对症疗法。补液疗法：生病的比熊常因脱水而死，因此补液是治聊本病的主要措施。用等渗的葡萄糖盐水加入5%碳酸氢钠注射液给予静脉注射。可根据脱水的程度决定补液量的多少。25%葡萄糖液5-40毫升，维生素c2-10毫升，能量合剂5-20毫升，一次缓慢静脉滴注，1-2次/日。有时比熊肠道出血严重时，洪山区细小病菌常见问题，常规止血药往往难以控制症状，应选用目前的新型止血药，以获得快速止血效果。对顽固性呕吐的患犬，建议肌注爱茂尔、氯丙嗪或硫suan阿托品止吐，并可一tian内用药多次，但因本病损害小肠严重，呕吐频繁，实际止吐效果有时并不理想。胃复安是临床常用的止吐药，但不宜用于本病止吐，其促进肠胃正向蠕动的药理效应往往造成肠道大量出血。所以治聊重点应放在止血，洪山区细小病菌常见问题、止泻、纠正脱水上，洪山区细小病菌常见问题，并对病比熊严格禁水，避免诱发频繁呕吐而使脱水不能得到有效纠正。
在实施例1中的引物和探针的引导下进行四重实时荧光定量pcr检测，25μl实时荧光定量pcr的检测体系包括：模板5μl、实时荧光定量pcr反应液2×onestepu+μl(购于vazyme公司)、onestepu+μl(购于vazyme公司)、10μm-4×混合引物μl、10μm-4×混合探针μl，rna-freeh2o5μl。实时荧光定量pcr反应条件可为：反转录52℃15min；95℃2min；pcr扩增条件：95℃15s，56℃30s，45个循环。在每个循环的退火结束时进行荧光信号检测。2)用得到的ct值或荧光信号的变化实现对cav-ii、cpv、cdv和cpiv定性检测，不同荧光通道出现标准的“s”型扩增曲线，表明待测样品中含有cav-ii、cpv、cdv和cpivbingdu，再根据荧光信号的强度和步骤，得出待测样品中所含有cav-ii、cpv、cdv和cpivbingdu的拷贝数，实现定量检测。3)具体判定方法：①若待测样品在hex通道中的扩增曲线为标准的s型曲线，且ct值≤32，则结果判定为cpivbingdu核酸阳性；②若待测样品在fam通道中的扩增曲线为标准的s型曲线，且ct值≤32，则结果判定为cpvbingdu核酸阳性；③若待测样品在cy5通道中的扩增曲线均为标准的s型曲线，且ct值≤32，则结果判定为cdvbingdu核酸阳性。
而拷贝数低或无拷贝数的样品bingdu含量不足，不能进行成品苗的配制，且s1-s3为cav2型bingdu疫苗半成品，s4-s6为cdvbingdu疫苗半成品，s7-s8为cpvbingdu疫苗半成品，s9-s10为cpivbingdu疫苗半成品，s11-s12为四种bingdu疫苗半成品。经检测s1-s3cav2型bingdu疫苗半成品可用于配苗，s4、s6cdvbingdu疫苗半成品可用于配苗，而s5拷贝数不达标不可用于配苗，s7cpvbingdu疫苗半成品可用于配苗，而s8拷贝数不达标不可用于配苗，s9-s10cpivbingdu疫苗半成品可用于配苗，s11-s12四种bingdu疫苗半成品可用于配制四联苗。实施例6、犬只源细胞检测使用实施例4的试剂盒对金宇保灵生物药品有限公司疫苗研究室提供的5份犬只源细胞的bingdu染上情况进行检测，检测方法与实施例2中步骤，待测样品编号为t1-t5，检测结果如下表6所示，可见本发明提供的对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行四重实时荧光定量pcr检测的试剂盒能够实现对犬只源细胞中bingdu染上的定性检测及bingdu含量的定量检测，可为疫苗生产过程中源材料的质量监控提供有力依据，确保疫苗生产的安全。表6：5份犬只源细胞样品的四重实时荧光定量pcr检测结果根据上表6的定性和定量检测结果。
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