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芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
由于活性珠子的百分比接近50%（酶与微球的比例大于~1：1.5)，然而，使用图像分析软件区分“开启”和“关闭”孔变得具有挑战性，我们达到了数字动态范围的实际上限。例如，图2中7fM(~45%活性）的信号偏离了线性。因此，这里使用50,000个孔展示的数字线性动态范围是从3.5fM到350zM，即大约四个对数单位。前提是蛋白质使用适当的酶浓度进行标记，这种动态范围对于许多临床应用来说是足够的 芯弃疾JX-8B简易版单分子ELISA检测产品，极速检测，快至15min就能完成的单分子免疫检测！科研场景用数字ELISA微量
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珠子以两种不同的方式读出。首先，在与100μMresorufin-阝-D孵育1小时后，用荧光板读出器以100μL方式读出珠子结合-半乳糖苷（RGP），一种荧光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板阅读器上，检测限为15fMofS阝G（图2）。其次，将珠子加载然后将RGP溶液密封到阵列的孔中，单个酶的信号被允许在反应室中积累，并每30秒获取一次荧光图像。实验结束时获取阵列的白光图像以识别含有珠子的孔（含有珠子的孔散射光与空井不同）。荧光图像用于确定哪些微球具有相关的结合酶（从时间变化的荧光图像中强度增加）。图2显示了微球中含酶的比例与总体S阝G浓度的关系的对数-对数图。检测到的比较低酶偶联物浓度为350飞摩尔（zM），并通过外推信号等于的酶浓度计算得出的检测限（LOD）。 芯弃疾单分子数字ELISA产品数字化ELISA芯片，帮您数字化高灵敏检测，且微量样本多重指标检测；
芯弃疾JX-8B数字ELISA，我们为什么能做到？产品主要原理同单分子阵列技术：
非常近，已经描述了两种数字蛋白质测量方法，这些方法能够提高对单分子水平的灵敏度。一种方法依赖于在固相上形成免疫三明治复合物，然后化学解离并通过激光计数每个分子。第二种方法由美国开发，依赖于单分子阵列和同时计数单分子捕获微珠。这两种方法都能将检测能力的下限降低10倍或更多，与增强的模拟放大方法相比，但后者技术也易于与高通量自动化仪器兼容，用于ELISA试剂处理。通过使用大量微孔阵列，可以同时获取和查询数百到数万个数据点，实现快速数据采集和稳健统计。此外，从阵列中可能获得的快速数据采集可以应用于预编码具有不同荧光特性的多个微珠亚群，从而在单分子水平上实现高通量多重分析。
创新性的解决方案：芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景：适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围：各种高灵敏多重免疫检测，可替代各种ELISA试剂盒，及其他免疫检测产品。
用DNA捕获探针(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA）功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的说明制备的。这些珠子与生物素化互补DNA的1μM（5’-生物素-CTCT）孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE缓冲液中过夜(16h）孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后，用PBS洗涤珠子三次含0.1%Tween-20的缓冲液。将珠子样品分装至微孔板中100μL中每孔给予400,000个微球。从微孔板孔中吸取缓冲液，将微球重悬后与不同浓度的ofSβG孵育。 芯弃疾JX-8B数字ELISA，微量检测，使用微量样本就能测试；
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动力学上，对于200,000个微球分散在100μL中，珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA（分别为17.3和30kDa）的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明，在2小时的孵育过程中，蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次，必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中，通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球（见下文），这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到，对应于泊松噪声的可接受变异系数（CV）为6-7%。第三，过高的微球浓度可能导致：a）非特异性结合增加，降低信噪比；以及b）分析物与微球的比例过低，导致活性微球的比例过低，从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿；可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时，为了获得可接受的背景信号（1%）和泊松噪声）。 芯弃疾单分子ELISA检测试剂盒，多重超敏检测，多重指标也能检测到亚皮克级！单分子检测数字ELISA
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芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列（图1C）我们称之为单分子阵列（SiMoA）——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步（图1A)，在微球（直径μm）上形成一个三明治抗体复合物，结合的复合物用酶标记，如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品，蛋白质的比值分子（以及由此产生的酶标记复合物）与微球的比例很小（通常小于1：1)，因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布，导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如，如果在(3000个分子）的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质，并且在200，000个微球上进行标记，则珠子，然后，。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术（例如，平板阅读器）的标签，因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积（通常为)，并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 科研场景用数字ELISA微量
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