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免疫组织化学的方法具有方便、快捷、稳定等优点并且对Lynch综合征的确诊具有指向性，因此被***接收，目前已几乎替代前者。上述MSI的传统检测方法不能用于对Lynch综合征的确诊，山西推荐dMMR抗体检测试剂郑重承诺，而免疫组织化学方法因直接检测相关蛋白对Lynch综合征具有***的指向性。为了提高对Lynch综合征的指向性，有学者建议将EpCAM列入错配修复蛋白检测行列，山西推荐dMMR抗体检测试剂郑重承诺。然而对Lynch综合征的确诊必需依赖于对MLH1、MSH2、MSH6、PMS2以及EpCAM基因进行突变或缺失的检查结果。四、错配修复蛋白染色错配修复蛋白染色结果判断应注意以下几点:1）着色部位是否为核；2）内对照（上皮细胞：正常肠上皮特别是腺体基底部细胞；间质细胞：淋巴细胞、平滑肌细胞，山西推荐dMMR抗体检测试剂郑重承诺、血管内皮细胞等）是否阳性；3）**细胞的细胞核是否为阳性（通常任何**细胞表达即判断为该错配修复蛋白阳性）错配修复蛋白结果解读:一种或多种错配修复蛋白表达缺失提示为MSI-H**。通常MLH1功能缺陷会合并PMS2表达缺失，而MSH2缺陷则常合并MSH6表达缺失，反之不然。迈杰转化医学基于基因组学、蛋白质组学、细胞组学及病理学等综合性转化医学全平台。山西推荐dMMR抗体检测试剂郑重承诺
msh6全称为mutshomolog6()，是一种错配修复基因，定位于2号染色体的p臂16位上。dna错配修复对于超时遗传信息完整性的维持是非常必要的。微卫星重现性的改变是由于dna复制时铰链不对位产生滑动而导致的结果，又称为微卫星不稳定性。突变型的错配修复基因常表达于高频度微卫星不稳定(msi-h)患者中，与常染色体的显性遗传性疾病相关，称为遗传性非息肉病性结直肠ai(hnpcc)，也可见于散发性(msi-h)结直肠ai患者。错配修复(mmr)蛋白是一组细胞核内酶，存在于所有的增殖细胞内，参与发生了dna复制过程碱基错配的修复。这些蛋白形成复合物(异二聚体)结合于非正常的dna并启动***过程。mmr蛋白的丧失导致增殖细胞中dna复制错误的堆积，特别是位于短重复核苷酸序列基因组的区域，这种现象即为所谓的微卫星不稳定性(msi)，因此，细胞中的mmr蛋白的缺失与微卫星高度不稳定(msi-h)密切相关，与此相反即是微卫星低度不稳定(msi-l)和微卫星稳定(mss)。人类已经认定的错配修复功能的基因有九个，其中五种和临床关系密切，因为在遗传性非息肉病性结直肠ai(hnpcc，又称lynch综合征)中可能发生突变，其中msh6发生频率9％。msh2与msh6形成异二聚体复合物，当msh2缺乏时，msh6蛋白也同样缺失。四川专业dMMR抗体检测试剂口碑推荐迈杰转化医学已基于客户需求建立了完整的病理学检测平台，可提供一站式病理学解决方案。
上述事实不断警醒我国医疗从业者及卫生决策者，要重视结直肠ai早期筛查预防及早诊早治的价值。我国结直肠ai早诊早治工作始于20世纪70年代，也并未落后于西方国家。但民众对于结直肠ai的知晓情况、疾病相关知识科普情况，远落后于西方国家，这导致大量民众不愿参与疾病筛查工作。或出于对自身健康的信心，或出于不愿花费时间成本的心理，或单纯出于讳疾忌医的心态。这都源于对疾病过程、疾病后果及早期***意义的缺乏认知。相关研究结果已经证明：依从性仍是我国结直肠ai筛查面临的主要问题之一。解决这一问题，有赖于从国民学龄期开始进行的卫生及健康宣传教育、医疗模式**和筛查形式的改进，如依托企事业、学校进行单位健康体检等。2.当前筛查策略存在局限：我国缺乏统一、规范、大规模的前瞻性研究论证和总结当前筛查策略及方案的优劣。筛查方法方面，FOBT及FIT在灵敏度和特异度方面存在较大局限性。结肠镜检查为当前结直肠ai进行人群筛查的金标准，因有侵入性及相关风险，普查人群依从性较差，也成为限制筛查工作推广的主要原因之一。结直肠ai筛查高危因素量化问卷具有我国特色，虽具备廉价、方便、易于***开展等优势，但其灵敏度及特异度低，*用于初筛。
具有两个或两个以上位点改变)、低频MSI(MSI-L，*有一个位点发生改变)以及微卫星稳定型(MSS，没有位点发生改变)。由于MSI-L结直肠ai在临床表现和病理改变上与MSSliu无明显差别，因此通常被归入MSSliu。约15％的结直肠ai经MSI途径发生，其中3％左右为家族遗传性(Lynch综合征)，12％为散发性。二、遗传性MSI-H结直肠ai(Lynch综合征)与散发性MSI-H结直肠ai1．Lynch综合征与散发性MSI-H结直肠ai发生机制的异同：作为经MSI途径发生的结直肠ai的典型**，Lynch综合征**初由Michigan大学病理系的Warthin博士于1913年**先发现并报道，至1966年Lynch医师明确了本病是一种常染色显性遗传的liu综合征，在迄今100年的发现和研究过程中，“ai症家族综合征(cancerfamilysyndrome)”、“Lynch综合征”、“遗传性非息肉病性结直肠ai(hereditarynon．polyposiscolorectalcancer)”等名称曾先后在不同时期被使用。随着近年来错配修复基因在本病发生中的作用逐渐明确，现在WHOliu分类将Lynch综合征这一名称用于携带有错配修复基因胚系缺陷的常染色体显性遗传性liu综合征。目前在Lynch综合征患者中发现的DNA错配修复缺陷包括三种类型：(1)错配修复基因的胚系突变。迈杰转化医学与全球品牌药企广f泛展开伴随诊断产品的开发合作，已有多个诊断产品上市。
筛选出分泌特定单克隆抗体的杂交瘤细胞株abm58060-20a2-pu。将此细胞株转入t-75培养瓶中扩增至对数生长期保种或进行后续实验。实施例3腹水诱生法制备单克隆抗体一、腹水制备对数生长期细胞用无血清培养基洗涤并悬起，计数～5×105，1ml。悬浮的细胞腹腔注射事先用石蜡油致敏的小鼠。7天后开始收集腹水。取出的腹水于4℃离心4000rpm，10min。小心吸出中间的腹水收集于离心管中，4℃或-20℃保存。二、单克隆抗体的纯化用hitraprproteinaff(ge公司)亲和层析法按说明书从腹水中纯化抗体。sds-page胶鉴定纯度，bradford法测定浓度。纯化的抗体保存于-20℃。实施例4单克隆抗体特性鉴定一、亚型鉴定用100mmpbs()稀释包被羊抗鼠igg(北京中杉金桥生物技术有限公司)至μg/ml,每孔加100μl，4℃，过夜。倾空液体，用含％tween的pbs(pbs-t)洗3次，每孔加入200μl封闭液(含2％bsa和3％蔗糖的pbs)，37℃孵育1h。倾空液体，用pbs-t清洗3次。每孔加入，37℃孵育1h。倾空液体用pbs-t清洗3次。用封闭液1：1000稀释hrp标记的羊抗鼠(κ,λ)抗体或1：2000稀释hrp标记的羊抗鼠(igm，igg1，igg2b，igg2b，igg3，iga)抗体，37℃孵育1h。倾空液体，用pbs-t清洗3次。迈杰基于基因组学、蛋白组学、细胞组学及病理组学等综合性转化医学平台，丰富的伴随诊断开发经验。山西专注dMMR抗体检测试剂共同合作
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当liu细胞出现一种或几种错配修复蛋白核表达的丢失，则提示liu为MSI-H。MLH1和MSH2作为错配修复复合体的共用亚单位，在发生功能缺陷时常同时伴有其同源错配修复蛋白的表达缺失。另外，如前所述，部分Lynch综合征是由于EpCAM基因胚系突变导致下游MSH2基因功能缺陷所致。Musulen等发现，在MSH2表达缺失的liu中检测出EpCAM蛋白缺失，与EpCAM基因突变的吻合率达100％，所以推荐将EpCAM免疫组织化学检测加入到Lynch综合征的筛查流程中。日常工作中用于鉴别肺腺ai与恶性间皮瘤的抗体Ber-EP4即是检测EpCAM的常用克隆之一。免疫组织化学检查错配修复蛋白表达缺失的作用如下：(1)提示哪个错配修复基因发生了功能缺失(表1)；(2)与MLH1启动子甲基化检测和／或BRAFV600E突变检测结合，区分散发性MSI-H结直肠ai和可疑Lynch综合征患者；(3)与EpCAM免疫组织化学检查结合，为后续的Lynch综合征遗传学突变检测提示方向。目前，4种主要的错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2均已有稳定的商品化抗体，但受组织固定、染色条件、抗体克隆号不同等因素的影响，可能会出现假阳性或假阴性结果。在判读免疫组织化学染色结果时应注意：(1)内对照是否阳性；(2)着色部位是否为细胞核；。山西推荐dMMR抗体检测试剂郑重承诺
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