[VIP第1年] 指数:3
windbells636买试剂盒做起来比较方便的，里面各种消化液，缓冲液，培养基都很齐全，不用自己去查资料到处购买，主要还有详细的操作步骤，省时省力windbells636之前虫友推荐了一家专门做原代细胞试剂盒的，好像叫CHI，楼主可以参考一下limi的猜想引用回帖:2楼:Originallypostedbywindbells636at2015-02-0909:43:44买试剂盒做起来比较方便的，里面各种消化液，缓冲液，培养基都很齐全，不用自己去查资料到处购买，主要还有详细的操作步骤，省时省力你用试剂盒做的话纯度可以达到多少？昵称头疼你需要养什么细胞？用试剂盒养细胞不如直接购买细胞来的方便快捷，而且现在原代细胞培养的试剂盒市面上还不多吧。我之前有听我们实验室的说过CHI有培养试剂盒，你可以网上搜下，但不知道效果怎么样没用过，不过我还是推介你直接购买细胞哦。windbells636引用回帖:4楼:Originallypostedbylimi的猜想at2015-02-0909:46:37你用试剂盒做的话纯度可以达到多少？...纯度可以80-90%limi的猜想引用回帖:5楼:Originallypostedby昵称头疼at2015-02-0909:50:39你需要养什么细胞？用试剂盒养细胞不如直接购买细胞来的方便快捷，而且现在原代细胞培养的试剂盒市面上还不多吧。脐静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展。上海裸鼠原代细胞分离
7)盖好培养瓶的盖子，轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。(8)将培养瓶放入培养箱中（37℃，5%CO2，95%空气）(9)放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基，以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。5、细胞培养过程中，多久更换一次培养基？这取决于细胞生长的速度。一般而言2-3天更换一次培养基，许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。注意：冻存细胞复苏后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。6、我能扩增培养和再次冻存原代正常人类细胞吗？这取决于细胞的类型。一些细胞类型像神经细胞，神经胶质细胞和一些生长缓慢的上皮细胞，不推荐扩增培养和再次冻存。其它的细胞类型像成纤维细胞、星形细胞、肾系膜细胞、星形胶质细胞等等，可以扩增培养和再次冻存。然而，需要注意的是再次冻存的过程可能导致细胞生长性能的改变。7、培养瓶中应该加入多少体积的培养基？我们推荐的用量为：T-25培养瓶5ml，T-75培养瓶15ml，T-150培养瓶30ml。上海哪里有原代细胞实验2~4h后轻轻翻转培养皿,补足培液使肌小粒浸浴于培养液中，3d换液一次,待细胞长满即可传代。
是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养3h到5h，待细胞贴壁后，再补足培养液继续培养。3、悬浮型原代细胞1）必须保持细胞的悬浮状态。可以通过增加培养液的黏度来帮助细胞呈悬浮状态，如给培养液中加入低浓度的透明质酸复合物。在有搅拌装置的培养器皿内加入培养液是，以5ml为限度，否则搅拌时会产生气泡对细胞造成伤害。使用这种方式需注意勿使搅拌速度过快，否则即可使培养液溢出又容易造成污染。如果培养液的量在5ml以下，可以采用旋转瓶培养。给悬浮培养的细胞换液时要注意不要吸出细胞。2）能够进行悬浮培养的细胞，其生命力一般都比较旺盛，体外分裂增殖的速度较快，营养成分消耗大，换液时间隔一般较短。原代细胞培养问题解答1、原代细胞与细胞系有什么区别？根据传统定义，收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney,.(1987)..(NewYork,.)].这类细胞直接从组织分离，生命周期有限，经数次传代后会逐渐停止生长。原代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长、分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。但实际上。
导语对于大部分科研人员来说，研究中一般用到均是现成的细胞系/株，我们只需要：进行细胞传代和保种。然而，这些细胞系常常由于体外长期培养，而丢失原有生物学特性，对药物处理的反应差距越来越大。因此，原代细胞的地位日渐凸显，Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而，就小编亲生经历，原代细胞分离着实是个技术活，我们就结合自身经验，为大家介绍：组织和正常组织的原代细胞的分离与培养方法。部分：原代细胞的基本知识1.什么是原代细胞培养?原代细胞（Primarycells）：是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。这里的组织主要指：组织、外周血及胚胎等。原代细胞培养：由于原代细胞生长缓慢，繁殖一定的代数停止生长（一般10代以内）。所以一般认为：培养的原代的第1和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。2.原代细胞与细胞系（celllines）的区别原代细胞和细胞系的比较：PrimarycellsCelllines增殖能力较弱强繁殖代数一般只能传10代以内无限增殖，50代左右遗传物质完整性遗传物质未改变遗传物质发生改变生物特性接近临床样本偏离临床样本培养容易程度比较复杂简单。心脏中，心肌成纤维细胞约占正常心肌组织细胞总数的60%-70%。
收藏查看我的收藏0有用+1已投票0细胞培养编辑锁定本词条由“科普中国”科学百科词条编写与应用工作项目审核。细胞培养（cellculture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术，通过细胞培养既可以获得大量细胞，又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。[1]中文名细胞培养外文名cellculture别名细胞克隆术语细胞培养技术地位生物技术中基础的技术常用培养基无钙、镁、离子溶液目录1分类2环境及条件▪环境因素▪营养条件3设施器材4一般过程5具体步骤6注意事项细胞培养分类编辑动物细胞培养高速冷冻离心机在所有的细胞离体培养中，困难的是动物细胞培养。血管平滑肌是许多重大血管疾病的细胞基础。上海裸鼠原代细胞分离
重组病毒以其高效和多样性，是非常有效的将外源基因导入细胞的方法。上海裸鼠原代细胞分离
一号培养板200顶部设置有梯形卡槽210，梯形卡槽210前侧壁固定安装有固定螺丝220，一号培养板200粘接在底座100的顶部，一号培养板200的顶部开有梯形卡槽210，梯形卡槽210前侧壁螺接有固定螺丝220，一号培养板200用于承载培养皿槽400和梯形卡槽210，梯形卡槽210用于配合梯形卡块310连接二号培养板300，固定螺丝220用于固定二号培养板300；请再次参阅图1，一号培养板200顶部设置有二号培养板300，二号培养板300底部固定安装有与梯形卡槽210相配合的梯形卡块310，二号培养板300底部粘接有梯形卡块310，二号培养板300通过梯形卡块310与一号培养板200卡接，二号培养板300用于承载培养皿槽400和梯形卡块310，梯形卡块310用于配合梯形卡槽210固定二号培养板300；请再次参阅图1，一号培养板200和所述二号培养板300表面设置有培养皿槽400，培养皿槽400内腔侧壁设置有限位槽410，限位槽410内腔固定安装有限位弹簧420，限位弹簧420顶部贯穿限位槽410设置有固定杆430，具体的，一号培养板200和所述二号培养板300表面开有培养皿槽400，培养皿槽400内腔侧壁开有限位槽410，限位槽410内腔螺接有限位弹簧420，限位弹簧420顶部贯穿限位槽410粘接有固定杆430，培养皿槽400用于承载限位槽410。上海裸鼠原代细胞分离
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