本实验技术要点: **细胞比较好经过饥饿处理,并且小室上下培养基的FBS有浓度差,以保证细胞可以穿透基质胶。铺细胞要均匀,滤膜底部不能产生气泡,否则会导致细胞染色不均匀,或者局部细胞无法穿透。根据细胞类型选择合适的膜孔径和膜类型。PET膜兼容***,适合绝大多数种类的细胞。侵袭实验的细胞密度比较大,一般在1 0 6cells/cm2左右,不同**细胞的接种密度、培养时间不同,需要参考文献和实验摸索。细胞太少,迁移不过去;细胞太多,可能导致正常组和实验组无差异。哪家Transwell小室是有正规授权的?上海干细胞培养细胞培养咨询报价
主要优点 •易掰耳片设计便于观察前从玻片上去除细胞培养小室,不需要特殊工具辅助,不会留下胶水或衬垫残余物 •聚丙烯培养小室耐受细胞固定液及染料,省去了观察分析时提前去除培养小室造成的不使 •可堆叠放置,节省宝贵操作台面 •方便细胞观察,易于采集相关数据图像 Millicell® ERS-2电阻仪 Millicell® ERS-2电阻仪是测量细胞膜电位的可靠设备,常被用来测定培养的上皮细胞的电阻或跨上皮细胞电阻(TEER)o ERS-2采用交流电(AC)定量检测单层的健康状态和细胞融合度。上海干细胞培养细胞培养咨询报价哪家血清是有正规授权的?
Millicell® ***培养型站立式培养小室 • 获得活性更高的培养细胞和组织,特别推荐用于体外移植物的立体培养和长期组织结构研究 • 较薄且更低的侧壁,使其更好地适合标准培养皿尺寸,操作也更方便 • Biopore™(PTFE)膜透氧性及透光性也非常出色,有助于提高细胞的存活力,**长超过40天 膜的类型及其特点 Biopore™ 亲水PTFE 膜 (聚四氟乙烯),CM 透氧透光性好,3D组织培养和观察优先 膜厚50μm,只0.4μm一种规格,需包被ECM。透明性很好,荧光背景低,蛋白吸附低,适合细胞显微观察。透氧性好,**适合用于组织***的长时间培养和观察。有站立式和***培养型Millicell®产品形式。
主要优点 ●1小时形成稳定的线性浓度梯度并至少维持48小时 ●区分趋化性与随机运动 ●多参数分析更利于机理研究 ●对慢速和快速迁移细胞都可以光学成像 ●可平行分析三种趋化物质,提高实验通量和分析能力 ●即买即用,无需其它配件 AXIS™神经轴突分离装置 AXIS”平台是默克密理博公司**技术的神经突生长研究工具。这个基于玻片的微流小窒系统可以培养神经细胞,并可在该系统中可控地加入生长因子,毒性物质及其它试剂。神经突的生长被限制在狭窄、平行的通道中,可以用显微镜方便地观察神经突生长与否。上海益启生物添加剂订购方便。
PET膜(聚酯)* 用于贴壁细胞的生长,无需胞外基质 这种蚀刻的薄膜式半透明的或者在光学显微镜下是透明的,所以可以对细胞单层提供更好的细胞可视性和监测。经组织培养基处理以促进细胞黏附性和生长 *这些膜均为亲水性膜 多孔插入式细胞培养板 无菌、即用的多孔插入式细胞培养板目前有24孔和 96孔两种。独特的设计,例如顶部辅助和泪珠状的 孔形,使Merck Millipore的板相比常规的多孔插入式 细胞培养板使用更加方便且重复性**提高。 顶部加样保护细胞单层细胞检测试剂盒上海授权代理商。黄浦区添加剂细胞培养规格
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取上述200μL细胞液加入小室,下室(培养板)加入900L含有10% FBS的培养基。不同规格的小室和培养板所加的体积不同,具体参考Millicell®产品说明书。37°C孵育24至72小时,依据**细胞类型而定。孵育结束,小心取出细胞小室,吸掉小室上层培养液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%结晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后进行第8步或者第9步。PBS清洗两次以去除多余的染料,立即用棉签擦去滤膜上层的细胞,自然静置风干。显微镜下观察滤膜下层的细胞,随机选取不同的视野计数并算平均值。结晶紫溶解滤膜下层细胞,然后用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm读取OD值。这种方法可以避免视野下细胞穿透不均匀带来的误差。上海干细胞培养细胞培养咨询报价
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