为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。⚑为什么存放于冰箱中的血清会出现沉淀?如何避免该现象?在2-8°C条件下存放,血清中的多种蛋白或脂蛋白会形成肉眼可见的沉淀,如血纤蛋白(fibrin),单体时处于溶解状态,在冻融过程中会发生聚集,形成肉眼可见的沉淀。但该现象一般不会影响血清的性能。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般**常用的是PES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。为尽量避免出现上述现象,建议血清分装成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反复冻融和融化后的血清在2-8°C条件下长时间放置。⚑血清是否需要做灭活处理?这取决于您的应用。灭活过程中,会导致血清中某些成分被破坏,如氨基酸,维生素,生长因子等。所以只有在您的实验对血清有特殊要求时,才会考虑对血清进行灭活处理。如您的实验对血清中的某种组分敏感,需要去除该组分。**常见的情况是需要去除血清中的补体蛋白,因为补体在机体中参与细胞杀伤,巨噬细胞和淋巴细胞活化,肥大细胞和血小板组胺释放,平滑肌收缩等过程。胎牛血清在瓶底絮状的物质是什么?西藏国产血清常见问题
并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。何谓热灭活?一般是以56C,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和***。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭***清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会***的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是"小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37C环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间。西藏国产血清常见问题热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质。
人体含有2750-3300毫升血浆,约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水(体积的90%),其中溶解的物质主要是血浆蛋白,还包括葡萄糖、无机盐离子、***以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞,同时也是运输分泌产物的主要媒介。将新鲜血液离心,使血细胞沉降,上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。主要作用●提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。●提供***和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质***(氢化可的松、**)、类固醇***(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。●提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及***等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。●对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。
细胞培养实验都要用到血清,而血清又分为胎牛血清、小牛血清和新生牛血清,***威正翔禹|缔一生物就给大家分享一下他们之间的区别以及保存方法~~~欢迎来围观哦!胎牛血清、小牛血清、新生牛血清之间的区别1、**时间不同胎牛血清(FetalBovineSerum)是在母牛怀孕5-8个月时,通过胎牛心脏穿刺**获取的血清。新生牛血清(NewbornCalfSerum)是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。小牛血清(CalfSerum)采自出生后2周至1年内的小牛静脉取血。2、组份与比例不同两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、***及其他活性物质等组份与比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎发育所必需的生长因子。一些生长因子到胎牛10个月时就消失了。3、用途与用法不同某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。血清保存和使用须注意:血清应保存在-5℃至-20℃。解冻血清时,推荐我们总结出来的三步法(见下表),可预防沉淀发生。不推荐血清4℃过夜融化,更不能直接将冷冻的血清放入37℃水浴或者温箱中。因为血清在融化时,蛋白先融,冰块后融,局部蛋白浓度过高,易发生沉淀。血清在解冻后,应按用量分装并于-20℃保存。胎牛血清(FBS)是从剖腹产的胎牛中提取的。
目前对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、***和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。鉴别方法血清血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被***,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆比较大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。血浆血液成分血浆是血液的液体成分,血细胞悬浊于其中。胎牛血清作为一种重要的生物制品。湖北血清报价
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。西藏国产血清常见问题
准备一个可以控温的储藏箱,将玻璃瓶存放在储存箱中,将储存箱中的温度控制在-5℃至-20℃的范围内;s3:过滤,将生血清在受控条件下解冻,并通过无菌过滤,**后过滤步骤使用多个,填料在层流罩内进行,层流罩经认证可维持100级条件,灌装室用高效空气过滤器过滤空气保持正压。血清被无菌地分配到伽玛射线照射的无菌petg或pete瓶中,装满的容器立即贴上标签并冷冻,然后保持在-5℃以下的温度以保持产品质量;s4:离心,将过滤后血清在-5℃以下的温度进行离心后静置,经过沉淀后得到需要的血清,离心的过程注意控制温度,防止温度波动过大,影响血清的离心,从血块中小心地取出血清,以避免被红细胞污染;s5:质量测试,通过化学分析、微生物检测和病毒检测对血清进行测试;s6储存和运输,fbs采用伽玛辐照、无菌petg或pete瓶供应。将血清冷冻保存在-5℃至-20℃的温度下,应避免血清多次冻融循环,导致产品变质,使用较小的包装尺寸或将血清分为适合一次性使用的小份,在将血清和等分物放入无菌容器时,务必使用无菌技术。本发明中,s1中,需要对血液提取装置和玻璃瓶进行消毒才能使用,s5中,化学分析是使用渗透压(蒸汽压法)和ph值是在仪器上测量的。西藏国产血清常见问题
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