抗体特性和功能:IgM占血清Ig总量的5%~10%,血清浓度约为1mg/ml。单体IgM以膜结合型表达于B细胞表面,构成B细胞抗原受体,只表达mlgM是未成熟B细胞的标志。分泌型IgM为五聚体,是分子量很大的Ig,沉降系数为19S,称为巨球蛋白(macroglobulin),一般不能通过血管壁,主要存在于血液中。五聚体IgM含有10个Fab段,具有很强的抗原结合能力;含有5个Fc段,比IgG更易启动补体,杭州异种抗体研发团队。天然血型抗体为IgM,血型不匹配的输血,可导致严重的溶血反应,杭州异种抗体研发团队。IgM是个体发育过程中很早合成和分泌的抗体,在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM,故脐带血lgM升高提示胎儿有宫内传染(如风疹病毒或巨细胞病毒等传染)。IgM也是初次体液免疫应答中很早出现的抗体,是机体抗传染免疫的“先头”;血清中IgM升高,提示新近发生传染,可用于传染的早期诊断,杭州异种抗体研发团队。抗体介导的细胞毒性可以直接杀伤传染的细胞,起到去除病原体的作用。杭州异种抗体研发团队
抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构,叫做抗原决定簇。一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇,因而使机体产生好几种不同的抗体,然后产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系,纯系的英文为Clone,音译就是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一种抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。上海Prestige Antibodies抗体研发制造抗体在婴儿期主要来自于母体传递,随着年龄的增长,婴儿自身的抗体产生能力逐渐增强。
多克隆抗体免疫动物:抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于调理,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。抗体的特异性鉴定 抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。
抗体主要功能:调理吞噬和ADCC。1.调理作用(opsonization)指IgG抗体(特别是IgG1和IgG3)的Fc段与中性粒细胞、巨噬细胞表面相应的Fc受体结合,从而增强吞噬细胞的吞噬作用。例如,细菌特异性的IgG抗体可通过其Fab段与相应的细菌抗原结合后,以其Fc段与巨噬细胞或中性粒细胞表面相应的Fc受体结合,通过IgG的Fab段和Fc段的“桥联”作用,促进吞噬细胞对细菌的吞噬。2.抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)指具E有杀伤活性的细胞(如NK细胞)通过其表面的Fc受体识别包被于靶细胞表面抗原(如病毒感染细胞或肿瘤细胞)上的抗体的Fc段,直接杀伤靶细胞。NK细胞是介导ADCC的主要细胞。抗体与靶细胞上的抗原结合是特异性的,而表达Fc受体细胞的杀伤作用是非特异性的 [4] 。单克隆抗体是由单一源头的B细胞产生的抗体,具有高度特异性。
抗体木瓜蛋白酶水解片段:胃蛋白酶水解片段:胃蛋白酶作用于铰链区二硫键所连接的两条重链的近c端,水解Ig后可获得一个F(ab’)2片段和一些小片段pFc’。F(ab’)2是由两个Fab段及铰链区组成,由于Ig分子的两个臂仍由二硫键连接,因此F(ab’)2片段为双价,可同时结合两个抗原表位,与抗原结合可发生凝集反应和沉淀反应。由于F(ab’)2片段既保留了结合相应抗原的生物学活性,又避免了Fc段免疫原性可能引起的副作用,因而被普遍用于制备生物制品,如白喉抗有害素、破伤风抗有害素均是经胃蛋白酶消化后精制提纯的生物制品。胃蛋白酶水解Ig后所产生的pFc 7然后被降解,无生物学作用。抗体检测可以用于检测病原体传染、免疫状态和疫苗效果等。四川PRR11多克隆抗体试剂
不同的抗体可以针对不同的病原体,形成免疫记忆以应对未来的传染。杭州异种抗体研发团队
多克隆抗体抗血清冻存:抗血清收获后,加 1/万硫柳汞或 1/万的叠氮钠防腐,或加入等量的中性甘油,分装小瓶,置-20℃以下的低温保存,数月至数年内抗体效价无明显变化。注意避免反复冻融。也可将抗血清冷冻干燥后保存。多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:1、制备抗原。2、选择实验动物。3、动物免疫。4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。6、纯化出抗体。7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。具体操作与制备原理参见中国免疫学实验网。杭州异种抗体研发团队
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